传统中药金钱草ISSR—PCR反应体系的正交优化研究(3)
通常情况下，引物主要影响PCR反应产物的产量，引物终浓度过低反应产量低，但过高会增加引物二聚或错配的几率[20]。赵春梅等[4]认为，ISSR技术是以SSR 序列为引物对SSR重复序列间的区域进行扩增，不同物种某一SSR序列重复数不尽相同，ISSR引物与模板的结合位点数量就会不同，并且引物与不同模板DNA的结合能力也不一致，这可能是引物对ISSR-PCR结果影响最大的原因。笔者支持这一观点，同时认为对于不同的引物和物种，影响最大的因素可能发生变化，比如某引物与实验模板DNA属于易于结合的情况，引物就可能不能成为影响最大的因素。Taq酶浓度过高可引起非特异性扩增，浓度过低则使合成产物量减少。Mg2+作为Taq酶的辅助因子，不仅影响Taq酶活性及合成的稳定性，还能与反应液中的dNTP、模板DNA及引物结合 ......
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