肺动脉高压大鼠肺组织中TGFβ1和IL6的表达水平及意义(3)
三、各組大鼠肺组织TGFβ1表达水平比较
3组的TGFβ1表达水平比较差异具有统计学意义(F=128935，P<0001)。与对照组相比，MCT3w组大鼠肺组织中TGFβ1的表达上调，而MCT5w组大鼠肺组织中TGFβ1表达比MCT3w组进一步增加(P<005)，见图2。
四、各组大鼠肺组织上清液中IL6表达水平比较
正常对照组、MCT3w组、MCT5w组大鼠肺组织上清液的IL6表达水平分别为(49±14)、(119±18)、(208±21)ng/L，3组的IL6表达水平比较差异有统计学意义(F=78864，P<
图1各组大鼠肺内小动脉的形态变化(van Geison 染色，×400)
A：正常对照组；B：MCT3w组；C：MCT5w组；D：各组WT%和WA%的比较；与正常对照组相比，*P<005；与MCT3w组相比，#P<005
, 百拇医药
图2TGFβ1在各组大鼠肺组织表达水平比较
A：蛋白免疫印迹法检测结果；B：扫描后光密度比值的比较；与正常对照组相比，*P<005；与MCT3w组相比，#P<005
0001)。与对照组相比，MCT3w组大鼠肺组织中IL6表达水平增加(P<005)，而MCT5w组大鼠肺组织中IL6表达水平比MCT3w组进一步增加(P<005)，见图3。
图3IL6在各组大鼠肺组织的表达情况
与正常对照组相比，*P<005；与MCT3w组相比，#P<005
讨论
野百合碱是一种生物碱，本身并无生物学活性，但其在体内经肝脏代谢后生成有活性的吡咯野百合碱，可使肺血管内皮细胞损伤、血管平滑肌异常增殖，从而导致血管重构和PAH[4]。本研究中，MCT3w组和MCT5w组大鼠与正常对照组相比，RVSP和RVHI均增高、肺小动脉中膜增厚，表明本研究的PAH模型已建立成功。TGFβ1和IL6在MCT3w组和MCT5w组肺组织中的表达水平均升高，而且在MCT5w组中升高更明显，提示TGFβ1和IL6可能参与PAH的发病，而且TGFβ1和IL6的表达水平与PAH的进展可能相关。
, 百拇医药
TGFβ1是一种多功能细胞活性调节因子，可通过各种受体和细胞外信号分子参与细胞的增殖、迁移和分化等活动[5]。越来越多的证据表明，TGFβ1信号通路异常与PAH的发病机制有关[6]。TGFβ1可通过调控多种信号通路抑制内皮细胞的凋亡、促进血管平滑肌细胞异常增殖、 增加细胞外基质沉积等过程，从而促进PAH的形成和发展[78]。相反，通过抑制TGFβ1及其下游信号分子的表达，可减缓血管平滑肌细胞的异常增殖、减少细胞外基质的沉积[9]。本研究进一步证实，随着疾病的进展和肺动脉压力的进一步增高，TGFβ1在肺组织中的表达也增多。由此可见，TGFβ1在PAH发生和发展中有重要作用，TGFβ1有望成为PAH治疗的新靶点。
IL6是由活化的T细胞和成纤维细胞产生的细胞因子，可通过介导炎症、促进血管平滑肌细胞增殖等机制在PAH发病中发挥重要作用[1011]。有研究者发现，在特发性 PAH患者血清和肺组织中IL6的表达增加[12]。本研究证实在野百合碱诱导的大鼠肺组织IL6水平显著增加，而且随着病程进展，IL6水平进一步增加。因此推测，IL6可能参与了PAH的发病及进展，通过降低肺组织IL6的浓度可能会降低肺动脉的压力，阻止PAH的进展。
, 百拇医药
综上所述，在野百合碱诱导的PAH模型中，大鼠肺组织中TGFβ1和IL6表达水平升高，TGFβ1和IL6可能参与PAH的发生和进展，有望成为PAH的治疗靶点。
参考文献
[1]Schermuly RT， Ghofrani HA， Wilkins MR， Grimminger F Mechanisms of disease： pulmonary arterial hypertensionNat Rev Cardiol，2011，8(8)：443455
[2]周敏，徐永健 肺动脉高压的治疗进展：呼吸系统疾病(6)新医学，2006，37(1)：5759
[3]Voelkel NF， Tamosiuniene R， Nicolls MRChallenges and opportunities in treating inflammation associated with pulmonary hypertensionExpert Rev Cardiovasc Ther，2016，14(8)：939951
, http://www.100md.com
[4]NogueiraFerreira R， Vitorino R， Ferreira R， HenriquesCoelho T Exploring the monocrotaline animal model for the study of pulmonary arterial hypertension： a network approachPulm Pharmacol Ther，2015，35：816
[5]Kajdaniuk D， Marek B， BorgielMarek H， KosKuda B Transforming growth factor β1 (TGFβ1) in physiology and pathologyEndokrynol Pol，2013，64(5)：384396
[6]Gilbane AJ， DerrettSmith E， Trinder SL， Good RB， Pearce A， Denton CP， Holmes AMImpaired bone morphogenetic protein receptor Ⅱ signaling in a transforming growth factorβdependent mouse model of pulmonary hypertension and in systemic sclerosisAm J Respir Crit Care Med，2015，191(6)：665677, 百拇医药(邓凯 邹勇 廖志新 郑常龙)
3组的TGFβ1表达水平比较差异具有统计学意义(F=128935，P<0001)。与对照组相比，MCT3w组大鼠肺组织中TGFβ1的表达上调，而MCT5w组大鼠肺组织中TGFβ1表达比MCT3w组进一步增加(P<005)，见图2。
四、各组大鼠肺组织上清液中IL6表达水平比较
正常对照组、MCT3w组、MCT5w组大鼠肺组织上清液的IL6表达水平分别为(49±14)、(119±18)、(208±21)ng/L，3组的IL6表达水平比较差异有统计学意义(F=78864，P<
图1各组大鼠肺内小动脉的形态变化(van Geison 染色，×400)
A：正常对照组；B：MCT3w组；C：MCT5w组；D：各组WT%和WA%的比较；与正常对照组相比，*P<005；与MCT3w组相比，#P<005
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图2TGFβ1在各组大鼠肺组织表达水平比较
A：蛋白免疫印迹法检测结果；B：扫描后光密度比值的比较；与正常对照组相比，*P<005；与MCT3w组相比，#P<005
0001)。与对照组相比，MCT3w组大鼠肺组织中IL6表达水平增加(P<005)，而MCT5w组大鼠肺组织中IL6表达水平比MCT3w组进一步增加(P<005)，见图3。
图3IL6在各组大鼠肺组织的表达情况
与正常对照组相比，*P<005；与MCT3w组相比，#P<005
讨论
野百合碱是一种生物碱，本身并无生物学活性，但其在体内经肝脏代谢后生成有活性的吡咯野百合碱，可使肺血管内皮细胞损伤、血管平滑肌异常增殖，从而导致血管重构和PAH[4]。本研究中，MCT3w组和MCT5w组大鼠与正常对照组相比，RVSP和RVHI均增高、肺小动脉中膜增厚，表明本研究的PAH模型已建立成功。TGFβ1和IL6在MCT3w组和MCT5w组肺组织中的表达水平均升高，而且在MCT5w组中升高更明显，提示TGFβ1和IL6可能参与PAH的发病，而且TGFβ1和IL6的表达水平与PAH的进展可能相关。
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TGFβ1是一种多功能细胞活性调节因子，可通过各种受体和细胞外信号分子参与细胞的增殖、迁移和分化等活动[5]。越来越多的证据表明，TGFβ1信号通路异常与PAH的发病机制有关[6]。TGFβ1可通过调控多种信号通路抑制内皮细胞的凋亡、促进血管平滑肌细胞异常增殖、 增加细胞外基质沉积等过程，从而促进PAH的形成和发展[78]。相反，通过抑制TGFβ1及其下游信号分子的表达，可减缓血管平滑肌细胞的异常增殖、减少细胞外基质的沉积[9]。本研究进一步证实，随着疾病的进展和肺动脉压力的进一步增高，TGFβ1在肺组织中的表达也增多。由此可见，TGFβ1在PAH发生和发展中有重要作用，TGFβ1有望成为PAH治疗的新靶点。
IL6是由活化的T细胞和成纤维细胞产生的细胞因子，可通过介导炎症、促进血管平滑肌细胞增殖等机制在PAH发病中发挥重要作用[1011]。有研究者发现，在特发性 PAH患者血清和肺组织中IL6的表达增加[12]。本研究证实在野百合碱诱导的大鼠肺组织IL6水平显著增加，而且随着病程进展，IL6水平进一步增加。因此推测，IL6可能参与了PAH的发病及进展，通过降低肺组织IL6的浓度可能会降低肺动脉的压力，阻止PAH的进展。
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综上所述，在野百合碱诱导的PAH模型中，大鼠肺组织中TGFβ1和IL6表达水平升高，TGFβ1和IL6可能参与PAH的发生和进展，有望成为PAH的治疗靶点。
参考文献
[1]Schermuly RT， Ghofrani HA， Wilkins MR， Grimminger F Mechanisms of disease： pulmonary arterial hypertensionNat Rev Cardiol，2011，8(8)：443455
[2]周敏，徐永健 肺动脉高压的治疗进展：呼吸系统疾病(6)新医学，2006，37(1)：5759
[3]Voelkel NF， Tamosiuniene R， Nicolls MRChallenges and opportunities in treating inflammation associated with pulmonary hypertensionExpert Rev Cardiovasc Ther，2016，14(8)：939951
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[4]NogueiraFerreira R， Vitorino R， Ferreira R， HenriquesCoelho T Exploring the monocrotaline animal model for the study of pulmonary arterial hypertension： a network approachPulm Pharmacol Ther，2015，35：816
[5]Kajdaniuk D， Marek B， BorgielMarek H， KosKuda B Transforming growth factor β1 (TGFβ1) in physiology and pathologyEndokrynol Pol，2013，64(5)：384396
[6]Gilbane AJ， DerrettSmith E， Trinder SL， Good RB， Pearce A， Denton CP， Holmes AMImpaired bone morphogenetic protein receptor Ⅱ signaling in a transforming growth factorβdependent mouse model of pulmonary hypertension and in systemic sclerosisAm J Respir Crit Care Med，2015，191(6)：665677, 百拇医药(邓凯 邹勇 廖志新 郑常龙)